SCIREQ SOFTRESTRAINT POUR LES ÉTUDES D’EXPOSITION
ÉVALUATION DES EFFETS LIÉS AU STRESS DE DIVERSES MÉTHODES DE CONTENTION CHEZ LES RONGEURS
Tout dispositif de retenue utilisé dans une configuration d'exposition par inhalation limitera, par définition, la capacité du sujet à bouger. Pour les configurations d'inhalation par le nez uniquement, les dispositifs de retenue typiques sont rigides, entièrement fermés et comprennent un piston en métal ou en acrylique forçant le sujet vers l'avant et l'empêchant de reculer. Des exemples de telles restrictions sont présentés ci-dessous :
Comme le montrent les images ci-dessus, les sujets sont fortement limités dans leurs mouvements et n'ont aucune capacité à réguler leur production de chaleur. De plus, s'il n'est pas correctement attaché, le sujet peut être capable de tourner dans le dispositif de retenue, ce qui a pour conséquence que les sujets se cassent le cou et s'étouffent.
Les SoftRestraints de SCIREQ sont conçus pour minimiser certains de ces effets importants que les contentions typiques ont sur le sujet. Premièrement, comme il n’est pas entièrement fermé, il permet une certaine circulation de l’air autour de la peau et de la queue, permettant ainsi aux sujets de réguler naturellement leur température corporelle. De plus, le maillage retient doucement les sujets tout en imposant peu ou pas de compression ou de restriction autour du thorax. De ce fait, les mouvements de la poitrine ne sont pas entravés et la capacité du sujet à s'adapter aux signaux environnementaux est maintenue. Ceci peut être observé pendant les périodes d'hyperventilation, car les sujets sont capables de réguler leurs habitudes respiratoires en réponse à un environnement d'exposition donné. Enfin, un clip peut être ajouté à l'arrière des SoftRestraints de SCIREQ pour maintenir la position du sujet. Ce mécanisme de verrouillage est facultatif et constitue une alternative douce à un antidévireur classique en métal ou en acrylique, qui peut comprimer la cavité thoracique et gêner la respiration et/ou la régulation respiratoire.
TRAVAILLER AVEC LES RETENUES SOUPLES
L'utilisation des SoftRestraints de SCIREQ, comme tout autre dispositif de retenue, nécessite une période d'acclimatation. En raison de sa conception, ce processus est susceptible d'être mieux toléré par les sujets par rapport aux dispositifs de restriction classiques et le temps d'acclimatation est réduit.
Les recommandations du protocole standard du SCIREQ pour l'acclimatation aux SoftRestraints sont répertoriées ci-dessous :
» Placez les sujets dans les dispositifs de contention et remettez-les dans leur cage pendant 5 minutes par jour, et augmentez lentement la durée chaque jour. Cela se déroulera sur une période de 1 à 2 semaines, jusqu'à atteindre le temps d'exposition souhaité dicté par le protocole.
» Placez les sujets retenus dans le système d’exposition avec seulement un flux de polarisation pendant toute la durée de la période expérimentale en jours séquentiels.
Le placement correct du sujet dans le dispositif de retenue est important pour son utilisation prévue. Les SoftRestraints de SCIREQ sont conçus pour maintenir le sujet fermement mais avec suffisamment de flexibilité pour éviter une constriction excessive. Il est particulièrement important qu'aucune forme bulbeuse dans le maillage ne soit autorisée autour du cou du sujet, car cela permettrait un mouvement excessif et des blessures potentielles si le sujet était coincé à la jonction du maillage et de l'anneau en plastique. Veuillez vous référer aux images suivantes ci-dessous à titre de référence, en notant que le sujet n'est pas anesthésié et simplement acclimaté à la contention.
Le système inExpose est un système d'exposition contrôlé par ordinateur qui peut générer de manière reproductible des conditions d'exposition. Une fois que le sujet est correctement positionné et acclimaté au SoftRestraint, les expositions seront cohérentes entre les sujets d'un groupe et les jours expérimentaux.
De nombreux clients SCIREQ utilisent les SoftRestraints dans leurs expériences quotidiennes. Certains de leurs commentaires et informations de contact correspondantes sont répertoriés ci-dessous pour faciliter la référence :
» Le Dr McHowat note qu'une fois les souris acclimatées (toujours en utilisant le même maître-animal), elles marchent simplement à l'intérieur des SoftRestraints. Les souris ne nécessitent aucun autre mécanisme de verrouillage et ont accepté les expositions sans difficulté.
» Le Dr Crotty-Alexander utilise régulièrement ces dispositifs de contention et a découvert que si les souris sont manipulées doucement et correctement, elles entrent généralement directement, car les souris sont naturellement curieuses et aiment les petits espaces.
Étude de validation
Drs. Tate et Mansell du Hudson Institute of Medical Research ont effectué une évaluation préliminaire interne concernant les niveaux de stress comparatifs chez les souris lorsqu'elles sont retenues à l'aide des inExpose SoftRestraints.
Ils étudient les niveaux de corticostérone dans le sérum de souris, en comparant les groupes suivants :
» Groupe 1 : Soumis à une anesthésie à l'isoflurane (Anesthésie).
» Groupe 2 : retenu en SoftRestraint pendant 15 minutes (Restraint).
Ils ont également analysé le sérum précédemment collecté au cours de leur procédure expérimentale standard chez des souris pour examiner leurs niveaux de stress à des fins de comparaison :
» Groupe 3 : Sérum de souris 3 jours après anesthésie à l'isoflurane et administration intranasale de PBS (dans du PBS).
» Groupe 4 : Sérum de souris 3 jours après anesthésie à l'isoflurane et inoculation intranasale avec le virus grippal A (en IAV).
» Groupe 5 : Sérum de souris 2 heures après injection intrapéritonéale de PBS (ip PBS).
» Groupe 6 : sérum de souris 2 heures après injection intrapéritonéale de LPS (ip LPS).
Drs. Tate et Mansell n'ont trouvé aucune différence significative en termes de stress en utilisant le SoftRestraint par rapport à leurs souris anesthésiées (p = 0.0967), PBS intranasal (p = 0.0967) et PBS injecté par voie intrapéritonéale (p = 0.0923) (en utilisant une ANOVA unidirectionnelle).
Figure 1 – Taux sériques de corticostérone non publiés chez la souris comparant différentes méthodes de contention et de traitement.
Prises ensemble, ces données démontrent que la contention des souris dans les SoftRestraints n'induit pas plus de stress que les méthodes actuelles d'immobilisation et de traitement des souris telles que l'anesthésie à l'isoflurane.
CONCLUSION
En résumé, toute retenue produira du stress sur les sujets. Comme indiqué ci-dessus, de par sa conception, le SoftRestraint sert à minimiser l'impact sur le sujet. Vous trouverez ci-dessous quelques publications scientifiques utilisant la configuration nez uniquement du système inExpose de SCIREQ.
» L'inhalation chronique de vapeur de cigarette électronique contenant de la nicotine perturbe la fonction de barrière des voies respiratoires et induit une inflammation systémique et une fibrose multi-organes chez la souris. Crotty Alexander LE., et al. (2018). Am J Physiol Intégr Comp Physiol. ajpregu.00270.
» La fumée de cigarette déclenche une inflammation associée à l'IL-33 dans un modèle de maladie pulmonaire obstructive chronique à un stade avancé. Lee, JH et coll. (2019). Journal américain de biologie cellulaire et moléculaire respiratoire, 61(5)
» Comparaison des réponses des voies respiratoires induites dans un modèle de souris par les fractions gazeuses et particulaires des gaz d'échappement des moteurs à injection directe d'essence. Maikawa, CL, et al. Journal international de recherche environnementale et de santé publique, 15(3). 2018.
Resources
Outiller les chercheurs
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