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Lavage bronchoalvéolaire (Bal)

Technique de lavage bronchoalvéolaire (BAL)

Au-delà de la mécanique respiratoire

Dans un cadre préclinique, les mesures de la mécanique respiratoire permettent de comprendre en profondeur la fonction, les structures et les volumes des poumons. Des techniques complémentaires sont souvent utilisées pour mieux comprendre les facteurs conduisant aux états pathologiques et à leur progression. Une procédure courante effectuée dans des modèles murins après des mesures de la fonction pulmonaire est le lavage bronchoalvéolaire (BAL).

La technique du lavage broncho-alvéolaire (LBA)

Le lavage bronchoalvéolaire est une technique utilisée à la fois en milieu clinique et préclinique. Il permet d'échantillonner la composition cellulaire et moléculaire des voies respiratoires, ce qui le rend particulièrement utile pour surveiller les réponses inflammatoires et immunitaires. Les BAL sont réalisées en injectant une solution tampon stable (type PBS ou sérum physiologique) dans les bronchioles puis en la récupérant délicatement par aspiration afin d'obtenir ce qu'on appelle le BALF : liquide de lavage bronchoalvéolaire. Les BAL sont une technique rapide, peu coûteuse et hautement reproductible et peuvent être facilement réalisées juste après la fin des mesures de la fonction pulmonaire avec le FlexiVent système, car le sujet est déjà trachéotomisé, canulé et prêt pour l'injection.

Analyse du liquide de lavage bronchoalvéolaire (BALF)

La récupération du contenu cellulaire et non cellulaire du liquide de revêtement épithélial des poumons permet une analyse quantitative et qualitative de ce contenu par diverses méthodes, notamment ELISA, immunoblot, cytométrie en flux, immunohistochimie, PCR, HPLC et plus encore.

Le liquide de lavage bronchoalvéolaire (BALF) peut contenir des anticorps et des cytokines impliqués dans l'attraction des cellules impliquées dans les réponses immunitaires et inflammatoires de modèles pathologiques tels que l'asthme. L'évaluation du niveau de ces protéines dans le BALF peut donner un aperçu de l'influx cellulaire modifié et de l'implication de chaque cellule dans l'hyperréactivité des voies respiratoires (AHR) et le développement de la maladie. Cela peut aider à trouver de nouvelles cibles et voies thérapeutiques pour la prévention et le traitement des maladies, ainsi qu'à évaluer l'efficacité des médicaments.

Cette technique peut également énumérer et identifier les sous-types de cellules dans le liquide BAL, souvent pour quantifier les niveaux de cellules inflammatoires telles que les éosinophiles, les neutrophiles et les lymphocytes pour évaluer l'infiltration cellulaire des voies respiratoires (Chesne et al.).

mesures flexiVent suivies de BAL

Il existe de nombreuses études publiées dans lesquelles le BALF est collecté à la suite de mesures de mécanique respiratoire avec le système flexiVent FX. Voici quelques publications récentes parmi la longue liste disponible dans la littérature :

  • Julie Chesne et al. (2014). Rôle principal de l'IL-17A dans la neutrophilie et la contraction des muscles lisses des voies respiratoires dans un modèle d'asthme allergique induit par les acariens. Volume 135, numéro 6, pages 1643–1645.e5. Doi : https://doi.org/10.1016/j.jaci.2014.12.1872
  • Davis, IC, et al. (2019). Le traitement avec des liponucléotides atténue l'asthme induit par le DRA chez la souris. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine ;199 : A3827
  • Ramos Ramirez, P., et al. (2019). La diminution de la production d'IL-5 induite par le budésonide n'affecte pas la bronchoconstriction induite par les allergènes ou la RHA dans un nouveau modèle d'asthme chez le cobaye. Journal respiratoire européen, 54 : PA4081 ; DOI : 10.1183/13993003.congress-2019.PA4081
  • Mariappan, N., et al. (2018). Manifestations pulmonaires du trioxyde d'arsenic inhalé à la suite d'une exposition accidentelle aiguë. Journal américain de médecine respiratoire et de soins intensifs ; 197 : A2974
  • Woo, L., et al. (2018). Le traitement avec un aptamère agoniste des récepteurs CD200 atténue l'hyperréactivité des voies respiratoires, l'inflammation des voies respiratoires et le remodelage dans un modèle murin chronique d'inflammation des voies respiratoires induite par HDM. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine ;197 : A1415
  • Hamakawa, Y., et al. (2018). La stimulation des récepteurs muscariniques améliore les phénotypes physiopathologiques dans le modèle murin de la MPOC. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine 2018;197 : A7158

 

Le Journal des expériences visualisées (JoVE) a récemment publié un guide complet sur la réalisation du lavage bronchoalvéolaire chez la souris, comprenant une démonstration vidéo du processus :

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